Luminex 100/200
Luminex® 100/200™ (EFRE-Förderung)
Das Gerät wurde durch Prof. Herrmann des FEN über EFRE-Mittel angeschafft und uns freundlicherweise als zentral anzubietende Technik zur Verfügung gestellt.
Geräteeigenschaften
Das Luminex® 100/200™ System ist ein auf der Durchflusszytometrie basierendes Gerät zur automatisierten, multiplexen Analyse von bis zu 100 Zytokinen oder löslichen Proteinen in Serum, Plasma, Zellkulturüberständen oder Lysaten.
Basierend auf dem gängigen Sandwich-ELISA Prinzip binden die zu untersuchenden Analyten an mit capture-Antikörpern gekoppelte Polystyrol-Kügelchen (Beads). Dabei ist jedes Bead spezifisch für einen bestimmten Analyt und kann aufgrund der eigenen Fluoreszenzeigenschaft von anderen unterschieden werden. Nach Inkubation mit den Detektionsantikörpern wird die Probe gemessen und die Konzentration der einzelnen Analyten mit Hilfe einer Standardkurve ermittelt.
Die xPONENT® 3.1-Software unterstützt den Nutzer bei der Bedienung des Gerätes und der Datenaufnahme. Sie ermöglicht das wiederholte Messen von Protokollen als Batch-Analysen und generiert exportierbare *.csv-Dateien.
Die Einweisung in das Gerät und die Software erfolgt durch die Mitarbeiter der ZSA und ist Voraussetzung für die eigenständige Nutzung.
Technische Spezifikationen
- Messung von ≤ 100 Analyten in einer Probe
- Probenvolumen bei Serum/Plasma 12,5 µL bzw. Überstand 50 µL
- 96well-Fomate: U, V, flat bottom
- Analyse einer 96well-Platte in 45 min
- Range: Serum/ Plasma ~0.2 - 3,200 pg/mL bzw. Überstand ~2 - 32,000 pg/mL
- Routinemäßige Kalibrierung und arbeitstägliche Leistungsüberprüfung (verification)
- nicht-proprietäres System: Kits können bei u.a. BIO-Rad, Merck, R&D oder ThermoFisher bezogen werden.
Akquisitions- und Analyse-Software
- xPONENT® 3.1.871.0
Applikationen (u.a)
- Immunantworten, z.B. Il-2, G-CSF, TNFa
- Metabolismus und Endokrinologie, z.B. Adiponektin, Leptin, Insulin
- Signalwege, z.B. Akt, EGFR, mTOR
- Krebsforschung, z.B. Bad, Bax, Smad