Cytek Aurora

Cytek™ Aurora (EFRE-Förderung)

Geräteeigenschaften

Das Cytek™ Aurora ist ein spektrales Durchflusszytometer und gehört damit zur neuesten Gerätegeneration. Die Besonderheit besteht darin, dass das gesamte Spektrum eines fluoreszierenden Farbstoffs aufgenommen und als spezifische Signatur erkannt wird. Damit können auch Farbstoffe miteinander kombiniert werden, deren Emissionsmaxima so nah beieinander liegen, dass sie von den herkömmlichen Durchflusszytometern nicht differenziert werden können. Mit dem Cytek™ Aurora und seiner aktuellen Ausstattung mit drei Lasern können bis zu 24 Farben parallel gemessen werden.

Das Cytek™ Aurora ist kompakt und durch den integrierten Loader für das 96 well Plattenformat hochdurchsatzfähig. Das intuitive Interface der SpectroFlow™ Software unterstützt den Nutzer bei der Bedienung des Gerätes, der Datenaufnahme- und der Auswertung. Das Gerät kann nach Einweisung durch die Mitarbeiter der ZSA eigenständig genutzt werden.

Technische Spezifikationen

  • Drei Laser: blau B (488 nm), violett V (405 nm) und rot R (640 nm)
  • 41 Kanäle: V1-V16, B1-B14, R1-R8 für die parallele Messung von bis zu 24 Farben
  • Drei Streulichtkanäle: blau FSC und SSC, violett SSC
  • Hohe Sensitivität des violetten SSC für die Detektion sehr kleiner Partikel
  • ≤ 35.000 Ereignisse/ Sek. können aufgenommen werden
  • Vakuum-basiertes Flüssigkeitssystem
  • Absolutzellzahlmessung durch volumetrischen Sensor
  • AMS Loader: Analyse in 96well-Platten (U, V oder flat bottom)

Akquisitions- und Analyse-Software

  • SpectroFlow™ Version 2.2.0.3 (07142020)
  • Datenformat FCS 3.1
LaserKanalBandbreiteDetektion von u.a.
Violet (405 nm)V1 420-435 BV421
  V2 436-451 SuperBright 436, ZombieViolet, eFluor450, VioBlue, AF405
  V3 451-466 eFluor450, VioBlue, PacBlue, DAPI
  V4 466-481 BV480
  V5 498-518 eFluor506
  V6 516-533  
  V7 533-550 BV510, VioGreen, ZombieAqua
  V8 571-590 BV570, PacOrange
  V9 588-608  
  V10 605-625 BV605, SuperBright600, QDot605, ZombieYellow
  V11 651-678 BV650, SuperBright645, QDot650
  V12 678-706  
  V13 706-735 BV711, SuperBright702, QDot705
  V14 735-365 BV750
  V15 765-798 BV785, QDot800, BV786
  V16 795-829  
       
Blue (488 nm)B1 498-518 BB515, sVio515, Vio515
  B2 516-533 FITC, AF488, ZombieGreen, vioBrightFITC
  B3 533-550 SparkBlue550, AF532
  B4 517-590 PE
  B5 588-608  
  B6 605-625 PE-Dazzle594, PE-eFluor610, PE-TexasRed, PE-CF594
  B7 652-669  
  B8 669-687 PE-Cy5, PerCP
  B9 688-707 PerCP-Cy5.5, PE-Cy5.5, BB700
  B10 707-727 PerCP-eFluor710, PerCP-Vio700
  B11 728-749  
  B12 749-772  
  B13 772-795 PE-Cy7, PE-Vio770
  B14 795-829  
       
Red (633 nm)R1 652-669 APC
  R2 669-687 AF647, eFluor660, Vio667, sVio667
  R3 688-707 SparkNIR685, APC-Cy5.5
  R4 707-727 APC-R700, AF700, R718 (BD)
  R5 728-749  
  R6 749-772 ZombieNIR
  R7 772-795 APC-Fire750, APC-AF750, APC-Cy7, APC-eFluor780, APC-H7
  R8 795-829 APC-Fire810

Applikationen (u.a.)

  • Vielfarben-Analysen für die Charakterisierung von Subpopulationen
  • Immunphänotypisierung von Zellgemischen, z.B. PBMCs (FSC/SSC-Differenzierung)
  • Analyse von kleinen Partikeln wie z.B. Vesikeln oder Bakterien
  • Analyse von Apoptose mittels Annexin:FITC oder Lactadherin:FITC
  • Zellzyklusanalysen mittels z.B. PI oder 7-AAD
  • Proliferationsassay (z.B. CFSE, BrdU)
  • Messung der Transfektionseffizienz von z.B. Reportergen-Zelllinien (z.B. GFP, YFP)