Cytek Aurora
Cytek™ Aurora (EFRE-Förderung)
Geräteeigenschaften
Das Cytek™ Aurora ist ein spektrales Durchflusszytometer und gehört damit zur neuesten Gerätegeneration. Die Besonderheit besteht darin, dass das gesamte Spektrum eines fluoreszierenden Farbstoffs aufgenommen und als spezifische Signatur erkannt wird. Damit können auch Farbstoffe miteinander kombiniert werden, deren Emissionsmaxima so nah beieinander liegen, dass sie von den herkömmlichen Durchflusszytometern nicht differenziert werden können. Mit dem Cytek™ Aurora und seiner aktuellen Ausstattung mit drei Lasern können bis zu 24 Farben parallel gemessen werden.
Das Cytek™ Aurora ist kompakt und durch den integrierten Loader für das 96 well Plattenformat hochdurchsatzfähig. Das intuitive Interface der SpectroFlow™ Software unterstützt den Nutzer bei der Bedienung des Gerätes, der Datenaufnahme- und der Auswertung. Das Gerät kann nach Einweisung durch die Mitarbeiter der ZSA eigenständig genutzt werden.
Technische Spezifikationen
- Drei Laser: blau B (488 nm), violett V (405 nm) und rot R (640 nm)
- 41 Kanäle: V1-V16, B1-B14, R1-R8 für die parallele Messung von bis zu 24 Farben
- Drei Streulichtkanäle: blau FSC und SSC, violett SSC
- Hohe Sensitivität des violetten SSC für die Detektion sehr kleiner Partikel
- ≤ 35.000 Ereignisse/ Sek. können aufgenommen werden
- Vakuum-basiertes Flüssigkeitssystem
- Absolutzellzahlmessung durch volumetrischen Sensor
- AMS Loader: Analyse in 96well-Platten (U, V oder flat bottom)
Akquisitions- und Analyse-Software
- SpectroFlow™ Version 2.2.0.3 (07142020)
- Datenformat FCS 3.1
Laser | Kanal | Bandbreite | Detektion von u.a. |
Violet (405 nm) | V1 | 420-435 | BV421 |
V2 | 436-451 | SuperBright 436, ZombieViolet, eFluor450, VioBlue, AF405 | |
V3 | 451-466 | eFluor450, VioBlue, PacBlue, DAPI | |
V4 | 466-481 | BV480 | |
V5 | 498-518 | eFluor506 | |
V6 | 516-533 | ||
V7 | 533-550 | BV510, VioGreen, ZombieAqua | |
V8 | 571-590 | BV570, PacOrange | |
V9 | 588-608 | ||
V10 | 605-625 | BV605, SuperBright600, QDot605, ZombieYellow | |
V11 | 651-678 | BV650, SuperBright645, QDot650 | |
V12 | 678-706 | ||
V13 | 706-735 | BV711, SuperBright702, QDot705 | |
V14 | 735-365 | BV750 | |
V15 | 765-798 | BV785, QDot800, BV786 | |
V16 | 795-829 | ||
Blue (488 nm) | B1 | 498-518 | BB515, sVio515, Vio515 |
B2 | 516-533 | FITC, AF488, ZombieGreen, vioBrightFITC | |
B3 | 533-550 | SparkBlue550, AF532 | |
B4 | 517-590 | PE | |
B5 | 588-608 | ||
B6 | 605-625 | PE-Dazzle594, PE-eFluor610, PE-TexasRed, PE-CF594 | |
B7 | 652-669 | ||
B8 | 669-687 | PE-Cy5, PerCP | |
B9 | 688-707 | PerCP-Cy5.5, PE-Cy5.5, BB700 | |
B10 | 707-727 | PerCP-eFluor710, PerCP-Vio700 | |
B11 | 728-749 | ||
B12 | 749-772 | ||
B13 | 772-795 | PE-Cy7, PE-Vio770 | |
B14 | 795-829 | ||
Red (633 nm) | R1 | 652-669 | APC |
R2 | 669-687 | AF647, eFluor660, Vio667, sVio667 | |
R3 | 688-707 | SparkNIR685, APC-Cy5.5 | |
R4 | 707-727 | APC-R700, AF700, R718 (BD) | |
R5 | 728-749 | ||
R6 | 749-772 | ZombieNIR | |
R7 | 772-795 | APC-Fire750, APC-AF750, APC-Cy7, APC-eFluor780, APC-H7 | |
R8 | 795-829 | APC-Fire810 |
Applikationen (u.a.)
- Vielfarben-Analysen für die Charakterisierung von Subpopulationen
- Immunphänotypisierung von Zellgemischen, z.B. PBMCs (FSC/SSC-Differenzierung)
- Analyse von kleinen Partikeln wie z.B. Vesikeln oder Bakterien
- Analyse von Apoptose mittels Annexin:FITC oder Lactadherin:FITC
- Zellzyklusanalysen mittels z.B. PI oder 7-AAD
- Proliferationsassay (z.B. CFSE, BrdU)
- Messung der Transfektionseffizienz von z.B. Reportergen-Zelllinien (z.B. GFP, YFP)